Clofazimin (Chlofaziminum)

Clofazimin là N,5-bis(4-clorophenyl)-3-[(1-methylethyI) imono]-3,5-dihydrophenazin-2-amin, phải chứa từ 99,0 % đến 101,0 % C₂₇H₂₂Cl₂N₄, tính theo chế phẩm đã làm khô.

1 Tính chất 

Bột mịn màu nâu đỏ, đa hình. Thực tế không tan trong nước, tan trong methylen clorid, rất khó tan trong Ethanol 96 %. 

2 Định tính 

Có thể chọn một trong hai nhóm định tính sau: 

Nhóm I: A. 

Nhóm II: B, C. 

A. Phổ hấp thụ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) của chế phẩm phải phù hợp với phổ hấp thụ hồng ngoại của clofazimin chuẩn. Nếu phổ của chế phẩm khác so với phổ của clofazimin chuẩn thì hòa tan riêng biệt chế phẩm và chuẩn trong methylen clorid (TT), bốc hơi đến khô và ghi lại phổ của các cắn thu được. 

B. Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4). 

Bản mỏng: Silica gel GF₂₅₄.

Dung môi khai triển: Propanol - methylen clorid (6 : 85). 

Dung dịch thử: Hòa tan 10 mg chế phẩm trong methyIen clorid (TT) và pha loãng thành 10 ml với cùng dung môi. 

Dung dịch đối chiếu: Hòa tan 10 mg clofazimin chuẩn trong methylen clorid (TT) và pha loãng thành 10 ml với cùng dung môi. 

Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên bản mỏng 5 µl mỗi dung dịch trên. Triển khai sắc ký tới khi dung môi đi được khoảng 2/3 bản mỏng. Để khô bản mỏng bằng cách đặt bản mỏng nằm ngang ngoài không khí trong 5 min. Tiếp tục triển khai sắc ký lần thứ 2 đến khi dung môi đi được khoảng 2/3 bản mỏng, để khô bản mỏng ngoài không khí và quan sát dưới ánh sáng tử ngoại ở bước sóng 254 nm. Vết chính trên sắc ký đồ của dung dịch thử phải giống với vết chính trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu về vị trí và kích thước. 

C. Hòa tan 2 mg chế phẩm trong 3 ml aceton (TT), thêm 0,1 ml acid hydrocloric (TT), màu tím đậm được tạo thành. Thêm 0,5 ml dung dịch natri hydroxyd 5 M (TT), dung dịch chuyển sang màu đỏ cam.

3 Tạp chất liên quan 

Phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3). Chuẩn bị các dung dịch ngay trước khi dùng. 

Pha động: Hòa tan 2,25 g Natri lauryl sulfat (TT); 0,85 g tetrabutylamoni hydrosulfat (TT) và 0,885 g dinatri hydrophosphat (TT) trong nước. Điều chỉnh đến pH 3,0 bằng dung dịch acid phosphoric 10% (TT) và pha loãng thành 500 ml bằng nước. Trộn 35 thể tích dung dịch thu được và 65 thể tích acetonitril (TT). 

Dung dịch thử: Hòa tan 50 mg chế phẩm trong pha động và pha loãng thành 100 ml với cùng dung môi. 

Dung dịch đối chiếu (1): Pha loãng 1,0 ml dung dịch thử thành 100,0 ml bằng pha động. Pha loãng 1,0 ml dung dịch thu được thành 10,0 ml bằng pha động. 

Dung dịch đối chiếu (2): Hòa tan 5,0 mg clofazimin chuẩn dùng để đánh giá tính phù hợp của hệ thống trong pha động và pha loãng thành 10,0 ml với cùng dung môi. 

3.1 Điều kiện sắc ký

Cột kích thước (25 cm x 4,6 mm) được nhồi pha tĩnh B (5 µm). 

Detector quang phổ từ ngoại đặt ở bước sóng 280 nm. 

Tốc độ dòng: 1,0 ml/min. 

Thể tích tiêm: 20 µl. 

3.2 Cách tiến hành

Tiến hành sắc ký với thời gian gấp 3 lần thời gian lưu của clofazimin. 

Định tính các tạp chất: Sử dụng sắc ký đồ cung cấp kèm theo clofazimin chuẩn dùng để đánh giá tính phù hợp của hệ thống để xác định pic của tạp chất B. 

Thời gian lưu tương đối so với clofazimin (thời gian lưu khoảng 15 min): Tạp chất A khoảng 0,7; tạp chất B khoảng 0,8.

Kiểm tra tính phù hợp của hệ thống: Trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (2), pic của tạp chất B phải tách khỏi pic của clofazimin đến tận đường nền.

3.3 Giới hạn

Tạp chất A: Diện tích pic tạp chất A không được lớn hơn diện tích pic chính trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (1) (0,1%). 

Tạp chất B: Diện tích pic tạp chất B không được lớn hơn 3 lần diện tích pic chính trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (1) (0,3 %). 

Các tạp chất khác: Diện tích pic của mỗi tạp chất không được lớn hơn diện tích pic chính trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (1) (0,1 %). 

Tổng diện tích pic của tất cả các tạp chất không được lớn hơn 5 lần diện tích pic chính trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (1) (0,5%). 

Bỏ qua những pic có diện tích nhỏ hơn 0,5 lần diện tích pic chính trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (1) (0,05 %). 

3.4 Ghi chú 

Tạp chất A: N,5-bis(4-Clorophenyl)-3-imino-3,5-dihydro-phenazin-2-amin. 

Tạp chất B: 5-(4-Clorophenyl)-3-[(1-methylethyl)imino]-N-phenyl-3,5-dihydrophenazin-2-amino.

4 Kim Loại nặng 

Không được quá 10 phần triệu (Phụ lục 9.4.8).

Lấy 2,0 g chế phẩm tiến hành thử theo Phương pháp 3. 

Dùng 2,0 ml dung dịch chì mẫu 10 phần triệu Pb (TT) để chuẩn bị mẫu đối chiếu. 

5 Mất khối lượng do làm khô 

Không được quá 0,5 % (Phụ lục 9.6). 

(1,000 g; 105 °C). 

6 Tro sulfat 

Không được quá 0,1 % (Phụ lục 9.9, phương pháp 2). 

Dùng 1,0 g chế phẩm.

7 Định lượng 

Hòa tan 0,400 g chế phẩm trong 5 ml methylen clorid (TT), thêm 20 ml aceton (TT) và 5 ml acid acetic khan (TT). 

Chuẩn độ bằng dung dịch acid percloric 0,1 N (CĐ), xác định điểm kết thúc bằng phương pháp chuẩn độ đo điện thế (Phụ lục 10.2). 

1 ml dung dịch acid percloric 0,1 N (CĐ) tương đương với 47,34 mg C₂₇H₂₂Cl₂N₄. 

8 Bảo quản 

Trong bao bì kín. 

9 Loại thuốc 

Điều trị bệnh phong. 

10 Chế phẩm 

Nang.